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URG

1.基本信息

品系名称:NOD.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1Deng Rag2tm1VstIl2rgtm1Vst /Vst

常用名:URG®小鼠;Tet-uPATg Rag2null Il2rgnull 小鼠

背景:NOD

毛色:白色


品系建立:

URG®小鼠,由4种基因修饰动物模型交配获得,包含2个转基因和2个基因敲除。2006年,宋希军等研究人员构建了TRE-uPA 转基因小鼠和Alb-rtTA转基因小鼠,然后交配获得了Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠;通过Dox诱导,在该小鼠中检测到了uPA表达和肝损伤[1]。维通达技术人员将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠连续8代回交到NRG(NOD背景的Rag2null Il2rgnull小鼠)背景,2012年获得Alb-rtTA/ TRE-uPA/Rag2null/Il2rgnull 小鼠,商品名为URG®小鼠。

作为新一代的可调控肝损伤人源化肝脏小鼠模型[2~6],人源肝脏细胞可以实现20-95%整肝重建。


2. 表型

(1)URG®同NRG(NOD-Rag2null Il2rgnull)小鼠一样,可以常规扩繁,并且可以在任何时间点用Dox诱导肝损伤。

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图1  URG®小鼠肝损伤分析。在不诱导时,检测不到表达uPA表达(C);在DOX饮水诱导后,免疫组化可以检测到uPA的表达(D)。uPA表达的肝脏呈苍白色(F);野生小鼠的肝脏是暗红色(G)。HE染色可见URG®小鼠肝细胞空泡化(H),而对照小鼠肝细胞形态正常(I)。


(2)URG®人肝脏细胞可以实现20%~95%的重建,外周血中人ALb逐步升高到毫克级的水平

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图2 URG®小鼠人肝细胞重建。(A,B) HE染色证明人肝脏细胞在URG小鼠肝脏中成功重建,染色浅的部分为人肝脏细胞;(C)人肝细胞移植后,随着时间延长,小鼠外周血中人血清白蛋白(human albumin)水平逐渐升高到毫克级水平。


(3)RT-PCR 和免疫组化(Albumin, CK18, CYP3A4)确认肝脏人源化URG®小鼠嵌合肝中人特异标记表达

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图3  人源化URG®小鼠,人鼠嵌合鼠肝脏RT-PCR分析表达人特异的基因(A);和人Albumin, CK18, CYP3A4免疫组化染色阳性(B)。


(4)肝脏人源化URG®小鼠HBV感染和HBV核心和C抗原组化染色

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图4  人源化URG®小鼠,支持人HBV病毒的感染。A,人源化URG®小鼠外周血中,HBV拷贝数的定量RT-PCR分析;B,HBV表面抗原和核心抗原染色阳性。


3. 应用领域

-URG® 小鼠和肝脏人源化URG® 小鼠可以用于人特异的肝病、药物安全性评估和人特异的肝脏代谢酶相关的研究

-HBV,HCV感染研究

-药物代谢与药代动力学研究

-干细胞研究

-基因治疗


4. 参考文献

(1)Xijun Song,Yushan Guo,Shuguang Duo,Jie Che,Chen Wu,Takahiro Ochiya,Mingxiao Ding,Hongkui Deng.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.

(2)Du, Y., Wang, J., Jia, J., Song, N., Xiang, C., Xu, J., Hou, Z., Su, X., Liu, B.,Jiang, T., et al. (2014). Human hepatocytes with drug metabolic function induced from fibroblasts by lineage reprogramming. Cell Stem Cell, 14,394–403.

(3)Azuma, H. et al. Robust expansion of human hepatocytes in Fah-/-/Rag2-/-/Il2rg-/- mice. Nature biotechnology 25, 903-910, doi:10.1038/nbt1326 (2007).

(4)Bissig, K. D. et al. Human liver chimeric mice provide a model for hepatitis B and C virus infection and treatment. The Journal of clinical investigation 120, 924-930, doi:10.1172/JCI40094 (2010).

(5)Xu, D. et al. Chimeric TK-NOG mice: a predictive model for cholestatic human liver toxicity. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 352, 274-280, (2015).

(6)Lander FoquetElizabeth M. WilsonLieven VerhoyeMarkus GrompeGeert Leroux-RoelsJohn BialPhilip Meuleman. Successful Engraftment of Human Hepatocytes in uPA-SCID and FRG® KO Mice.Hepatocyte Transplantation pp 117-130.