(1)CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas9能够靶向基因组的特定序列,产生DNA双链断裂,引发非同源末端修复。可用于基因敲除,小片段基因敲入和基因条件敲除等基因编辑。
1. 技术流程:
载体构建→设计制备gRNA→显微注射→出生小鼠检测→阳性小鼠获得
2. 技术优势:
-高效率基因敲除,双gRNA策略能够删除大片段DNA,从几十bp到Mb,几乎没有长度限制。
-基因敲入严重依赖片段长度,1kb以上,敲入效率急剧下降。
-点突变等小范围基因编辑效率高。