基本信息

品系建立

B2m基因编码的β2 microglobulin是MHC I类分子的亚基。MHC I类分子介导的T细胞反应在异种排斥反应中起到重要作用。B2m基因敲除后，小鼠细胞表面不再表达MHC I类分子，人PBMC移植后发生的人源免疫细胞攻击小鼠细胞的移植物抗宿主病（GvHD）被显著减弱，GvHD发生的时间从移植后平均3-4周延迟到平均6-8周。为此，采用CRISPR-CAS9技术将NPG小鼠的MHC class I 分子B2M (beta-2 microglobulin)基因2号外显子及附近内含子删除了674bp，获得B2m基因敲除的NPG小鼠。

B2m基因敲除的纯合子小鼠细胞表面几乎没有 MHC I类蛋白的表达。在CD8⁺毒性T细胞严重缺乏的状态下，CD4⁺毒性T细胞会补偿性增加。CD8⁺毒性T细胞严重缺乏的免疫应答反应提供一种途径来评价 CD8⁺T 细胞及 MHC I 类蛋白在多种免疫反应中的作用。使用NPG B2m小鼠建立PBMC人源化小鼠模型可以比NPG小鼠的PBMC模型获得更长的实验窗口期，为研究 xenogeneic-GvHD 的体内机制并评估相应治疗药物提供了可用的小鼠模型，因而是一种更理想的人源化小鼠模型，在肿瘤免疫研究中具有重要应用价值。

表型信息

1. 人源PBMC在NPG-B2m小鼠的重建效果

图1. NPG与B2m-NPG小鼠接种Hu-PBMC (5×10⁶)后的体重曲线、体况与重建水平

NPG与B2m-NPG移植Hu-PBMC细胞后，与NPG小鼠相比，DK-NPG小鼠的GVHD反应得到延缓。如图所示，B2m移植PBMC后5 w未发生GVHD（左侧），NPG移植PBMC后5w出现GVHD（右侧）。

NPG-B2m小鼠肿瘤造模案例

1. 构建人肺癌模型及移植Hu-PBMC研究

图2. B2m-NPG小鼠的HCC827造模与移植Hu-PBMC的效果

6-8周龄雌性NPG与B2m-NPG小鼠(n=5 per group)皮下注射HCC827人非小细胞肺癌细胞系，待肿瘤生长到90 mm³时给予Hu-PBMC，持续观察，结果发现B2m-NPG小鼠的生存周期显著延长，移植Donor的PBMC有一定的抑瘤效果。

B2m-NPG小鼠应用领域

1. 异源移植GVHD体内机理研究

2. 接种人源肿瘤或组织用于筛选相关药物，如肿瘤免疫抗体药物、CAR-T的药效研究等

3. 制备免疫系统人源化小鼠模型，如接种PBMC或HSC获得的免疫系统人源化小鼠模型

4. 人类造血系统和免疫系统研究

参考文献

1. Shultz LD, Schweitzer PA, Christianson SW, et al. “Multiple defects in innate and adaptive immunologic function in NOD/LtSz-scid mice”. J. Immunol. 1995, 154: 180-191.

2. King MA; Covassin L; Brehm MA; et al. 2009. Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex. Clin Exp Immunol, 2009, 157(1):104-18.