基本信息
品系名称 | NOD. Prkdcscid Il2rgtm1 Vst Tg(Csf1p – hCSF2) / Vst |
常用名 | hCSF2-NPG /Vst; hCSF2 NPG |
来源 | 北京维通达生物技术有限公司 |
背景 | NOD SCID/NcrCrl |
毛色 | 白色 |
编辑基因 | CSF2 |
品系建立
CSF2，又称为GM-CSF（粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子），是一种造血生长因子，刺激中性粒细胞和巨噬细胞的发育，促进早期红系巨核细胞和嗜酸性祖细胞的增殖和发育。为此，维通达采用转基因的方法，扩增小鼠CSF1的ATG上游1.2Kb的片段（含启动子），与人CSF2的CDS连接，插入pCDNA3.1载体中，构建pCDNA3.1-Csf1p-hCSF2表达载体（如下图所示）。酶切分离表达载体片段，将该片段注射到NPG小鼠的原核中。在获得的后代中筛选到合适表达量的阳性小鼠，在隔离器中，按照近交的方式扩繁，建立商品化的hCSF2 NPG小鼠品系。
hCSF2 NPG小鼠，表达合适含量的人CSF2蛋白，与表达人M-CSF和IL3细胞因子的NPG小鼠一起，在移植人CD34+造血干细胞6-8周后，于外周血、骨髓、胸腺和脾脏以及包括肺和肝在内的非淋巴组织中，形成稳定广泛的髓系和淋巴系细胞分化。在血液和组织中，可检测到粒细胞分化（嗜碱性粒细胞、中性粒细胞和肥大细胞），抗原呈递细胞分化（树突状细胞和巨噬细胞）和调节性T细胞群体等。该小鼠在人源化、癌症治疗、人体过敏反应模型、传染病、免疫学和再生医学研究中有更精确的应用。
图1. hCSF2-NPG构建示意图
表型信息
1. 移植脐血CD34+ HSC细胞重建分析
表1. hCSF2-NPG移植HSC后3周后外周血流式分析
hCD45+ in MNC | hCD14+ in hCD45+ |
11.0% | 60.2% |
7.5% | 64.8% |
5.6% | 59.0% |
2.8% | 39.8% |
2.3% | 43.9% |
1.3% | 60.5% |
0.6% | 59.0% |
0.2% | 30.0% |
hCSF2-NPG小鼠应用领域
1. 人源化和癌症治疗
2. 人体过敏反应模型，免疫、造血移植重建模型
3. 再生医学
4. 感染性疾病
参考文献
1. Wunderlich M, Chou FS, Link KA, et al. AML xenograft efficiency is significantly improved in NOD/SCID-IL2RG mice constitutively expressing human SCF, GM-CSF and IL-3. Leukemia. 2010, 24(10):1785-1788.
2. Ito R, Takahashi T, Katano I, et al. Establishment of a human allergy model using human IL-3/GM-CSF-transgenic NOG mice. J Immunol. 2013, 191(6):2890-2899.
3. Rongvaux A, Willinger T, Martinek J, et al. 2014. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nat Biotechnol 32(4):364-372.
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