扩繁：目前小鼠品系已达上万种，大鼠品系也超过上千种，这些品系的繁殖性能千差万别，需要根据具体品系的特点，针对性的优化种群管理方案。依托20年的大小鼠种群管理经验和完善的动物设施质控体系。

维通达可以根据客户需要，制定合适的扩繁方案，提供品系建立、常规扩繁、快速扩繁和活体保种等专业服务。

一、品系建立

大鼠和小鼠，按照育种方式不同，分为近交系和封闭群。JAX将遗传背景不清楚的；或者首建鼠（Founder）来源于3种或以上品系；或者首建鼠是远交系（Outbred），统称为群（STOCK）。比如，STOCK按照全同胞兄妹交配20代之前，仍称为STOCK；兄妹交配20代之后，称为近交系（Inbred）。

品系建立根据具体情况选择不同的繁殖策略，包括简单扩繁和复杂扩繁。品系建立一般包含两个方面的内容：（1）基因型鉴定（PCR或测序鉴定）和表型分析；（2）种群的选择和扩繁。维通达可以提供品系建立的全套或者部分（客户选择）的服务。

1. 品系建立流程

对于随机转基因和CRISPR技术产生的敲除鼠，由于插入位点/删除碱基数/拷贝数的不同，每一只founder（F0）的基因型和表型可能不同。维通达可以为客户提供标准的品系建立服务，筛选到符合实验需要的基因编辑模型（品系，见下图，源于JAX）。

首建鼠（Founder）与野生鼠（WT）交配，获得杂合F1代，杂合F1代交配获得纯合F2代。从F1或F2代中选择种鼠（breeders），建立符合要求的品系。

（1） 简单品系（KO或KI等）扩繁流程

（2） 复杂品系（转基因等）扩繁流程

二、快速扩繁

采用超数排卵的方法获得卵母细胞，通过新鲜或冷冻精子进行体外受精（IVF），将2-cell时期的受精卵胚胎移植到代孕小鼠体内，一代获得大量子代小鼠的过程。

（1）快速扩繁优势

-只需要提供精子或少量雄性小鼠。

-6~12周即可提供大量同批次后代。

-基因敲除或CKO小鼠繁育周期缩短30~50%。

（2）科学经济扩繁方案制定：

按照计划扩繁，获得足够数量的大小鼠模型，是确保实验进行的前提。维通达主要依据大小鼠的扩繁性能和行业认可的扩繁性能计算公式，制定科学经济的扩繁方案。

基本生理参数：

-小鼠6~8周左右性成熟，大鼠8~10周左右性成熟

-小鼠孕期约3周（19~21天）；大鼠孕期约3.2周（22~25天）

-首胎间隔4~6周。

-小鼠传一代需要3个月左右。

影响扩繁速度的雌雄鼠因素：

①雄鼠，精子数量多，只要具有受精能力，一般不是限速因素；

②雌鼠，孕期3周，哺乳3~4周，窝间隔一般1.5~2个月，常常是限速因素。

案例一：KPC小鼠快速扩繁方案的制订

KPC小鼠简介，包含3种基因修饰：①TRP53基因含有一个显性点突变 TP53R172H ，纯合小鼠在3月龄会有较高的自发肿瘤比例；②KRAS基因含有一个条件性突变KRASG12D，上游含有lox-stop-lox终止序列，其在没有cre重组酶的条件下是不表达的；③PDX1-Cre在胰腺的腺泡、胰岛和导管中表达。KPC小鼠中突变的KRAS基因含有的lox-stop-lox终止序列被切除，从而在胰腺中表达KRASG12D蛋白和 TP53R172H蛋白。

根据该模型的特点，①KPC小鼠3基因互配，会产生2=12种后代，其中目的小鼠KPC（3基因杂合子获得的比例）；选择P纯合双基因或3基因阳性鼠作种鼠可以提高后代的阳性率（提高4倍）；②P纯合小鼠在3月龄会有较高的自发肿瘤比例，适宜于在5~6月龄退役前使用，因而最好的方案是IVF快速扩繁。

根据上述特点，KPC小鼠适宜采用IVF快速扩繁技术和传统扩繁结合的方式进行扩繁： 

（1）KC精子与野生型小鼠的卵，IVF快速扩繁；

（2）P53纯合小鼠的精子与野生型小鼠的卵，IVF快速扩繁；

（3）选用KC与P纯合，KC与P纯合C，KC与KP纯合或KPC，PC与KP纯合或KPC，这样的种鼠组合，后代可以获得高比例的3基因杂合KPC目的小鼠。