品系净化是指,通过特定处理,消除病毒、细菌和寄生虫,得到SPF级别动物的服务。维通达通过胚胎清洗和胚胎移植的方式,获得SPF级别的动物;同时委托第三方提供相关微生物检测服务,出具相关检测合格报告。
1. 服务简介
胚胎净化常用的方法包括剖腹产和胚胎移植,但由于剖腹产不能消除垂直传播的病毒(如鼠巨细胞病毒MCMV;淋巴细胞性脑膜炎病毒LCMV和脑胞内原虫ECUN),且对于手术设施依赖程度较大,目前常用易行的方法为胚胎移植的方法。
2. 服务类别:
净化服务,根据饲养环境不同分为两类:IVC净化和隔离器净化。
根据净化级别,使用的代孕鼠和净化方案、设施均不同。常用的净化标准包括:(1)VAF/PLUS®;(2)GB-SPF;(3)VAF/ELITE®;(4)定制标准。
根据基因型不同,可以分为纯合净化或者杂合净化。纯合净化需要准备一定数量,基因型均为纯合的雌鼠和雄鼠;杂合净化只需要提供基因型符合需要的2~3只可育雄鼠即可。
3. 胚胎净化流程
为了确保净化成功,需要对净化的流程进行标准化控制(见图示):
①净化前,对净化品系的病原感染情况进行评估,如对清洗胚胎的溶液进行Q-PCR分析,确认病毒含量;
②净化时,净化品系与SPF野生雌鼠交配获取胚胎,降低病毒通过透明带进入胚胎的概率;③净化后,对哨兵鼠或净化大小鼠进行微生物检测确认病原是否净化掉。由于从微生物感染到检测出来有一定的潜伏期,因而应根据具体的情况制定相应的策略。
4. 胚胎净化选用标准建议
检测的微生物项目越多,产生的检测费用也会越多。但是对于特定研究而言,也不是检测的项目越多越好,应根据实际的实验要求选择相应的标准。一般选择的原则是:采用隔离器净化。
我们可根据客户需求增加检测项目,费用根据检测项目增减。通常情况下获得符合健康标准的动物模型,就可以排除微生物的干扰,进行扩繁或开始正式的实验。
5. 胚胎净化的交货周期与标准
服务类型 | 客户提供 | 交付标准 | 周期 |
IVF净化 | 1~2只可育雄鼠 | 6~10只后代 | 7周~3个月 |
自交净化 | 2~4只可育雄鼠,4~8只3~12周龄雌鼠 | 6~10只后代 | 7周~3个月 |
IVF净化+快速扩繁 | ~2只可育雄鼠 | 20~200只后代 | 2~3个月 |