基本信息
品系名称 | C57BL/6N-PD-L1emTg(CAG-hPD-L1)/VST |
常用名 | hPD-L1/PD-L1-/- |
来源 | 北京维通达生物技术有限公司 |
背景 | C57BL/6NCrl |
毛色 | 黑色 |
相关基因 | PD-L1 |
品系建立
首先，将CAG-hPD-L1 线性化片段注入C57BL/6NCrl小鼠胚胎原核，获得hPD-L1-Tg阳性小鼠，构建方式如图1。
图1. hPD-L1-Tg小鼠构建示意图
其次，制作PD-L1基因敲小鼠，用小鼠PD-L1基因特异sgRNA (single-guide RNA)介导Cas9核酸酶切割DNA出现特定的DSBs（Double-Stranded Breaks），本小鼠以转录本PD-L1-201为对象，在2号内含子和6号内含子处切割基因组，通过NHEJ（Non-homologous end Joining）修复途径，将2个切口直接连接，删除exon3至exon6序列，达到敲除小鼠PD-L1基因的目的。
图2. PD-L1基因敲除小鼠构建示意图
通过表型分析，选择hPD-L1-Tg阳性小鼠与PD-L1基因敲除小鼠互配，获得 hPDL-1/mPDL-1-ko小鼠（C57BL/6N-PD-L1emTg(CAG-hPD-L1)）。
基因型鉴定信息
图3. hPD-L1 随机转基因小鼠鉴定凝胶电泳图
图4. PD-L1基因敲除小鼠鉴定凝胶电泳图
hPD-L1小鼠应用领域
1. PD-L1靶向药物开发和筛选
2. PD-L1靶向药物药效及安全性评价
3. 肿瘤免疫疗法评估
4. 免疫系统和肿瘤免疫逃逸机制研究
5. 人PD-L1抑制剂的肿瘤治疗效果
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